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什么是分离度?影响分离度因素有哪些?
又称分辨率,为了判断分离物质对色谱柱在色谱柱中的分离情况,常用分离度作为柱的总分离效能指标.用R表示.R等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比. 相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。R越大,表明相邻两组分分离越好。一般说当R<1时,两峰有部分重叠;当R=1.0时,分离度可达98%;当R=1.5时,分离度可达99.7%。通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志。
当R=1时,称为4σ分离,两峰基本分离,***峰面积为95.4%,内侧峰基重叠约2%。R=1.5时,称为6σ分离,***峰面积为99.7%。R≥1.5称为完全分离。《中国药典》规定R应大于1.5。 分离度计算公式:R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)
分离度的类型?
按分离机理分为吸附、分配、交换、排阻以及亲和五种类型。
利用组分在吸附剂(固定相)上的吸附能力强弱不同而得以分离的方法,称为吸附色谱法。
固定相是固体,目前这种分离模式在液相色谱中用途很小。
利用组分在固定液或者键合固定相(固定相)中溶解度不同而达到分离的方法称为分配色谱法。
固定相是涂覆的固定液或者键合的固定相,是目前主流的分离模式,涵盖了目前液相色谱应用范围的大部。
利用组分在离子交换剂(固定相)上的亲和力大小不同而达到分离的方法,称为离子交换色谱法。
该分离模式主要用来分离离子型化合物,正是由于如此,现在离子色谱已经从液相色谱中分离出来,称为离子色谱。
利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而达到分离的方法,称为凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法。这个主要用来分离高分子子化合物,比如蛋白、比如聚合物。
利用不同组分与固定相(固定化分子)的高专属性亲和力进行分离的称为亲和色谱法,常用于蛋白质分离。
常用分离度作为著的总分离效能指标。按分离机理分为舒服,分配交换,牌组以及亲和五种类型。分离度及影响因素,第七节,系统适应性试验,第八节,测定法,第九节,色谱吸附或者分配等温线。分离度定义为相邻两峰保留值之差以下两方宽之和的一半的比值四式中。
分离度(resolution,又称为解析度、分辨率)是色谱图中相邻两峰分离程度的量度。两峰间的分离程度受两峰尖的距离和两峰各自峰宽的制约。若保持峰宽不变,加大峰间的距离则分离程度加大,即分离度与两峰的保留时间之差成正比;若保持两峰间距离不变,使峰的宽度减小,两峰分离程度亦将增大,即分离程度与峰宽成反比。
分离度定义为相邻两峰保留值之差与两峰宽之和的一半的比值式中,分别为组分A和B的保留值;分别为组分A和B的峰底宽度。
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